نوع همکاری : همکار
کارفرما : دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
سال طرح : 1401
مشاهده سایر طرح های جعفر آقاجاني
مقدمه و هدف: ماندگاری احتمالی باکتری در خون انسان به عنوان اشکال کمبود دیواره سلولی (شکل L) یک اولویت تحقیقاتی برای میکروبیولوژیست ها است. استفاده از واکسن زنده BCG و تبدیل L-form سویه واکسن ممکن است جنبه جالب توجه جدیدی را در مورد فرصت وقوع کلونیزاسیون غیرقابل پیش بینی در داخل بدن انسان توسط اشکال حیات میکروبی غیرمعمول نشان دهد. هدف از این مطالعه بررسی ساختاری L-forms در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می باشد. روش کار: کشت های L-form از 141 نمونه خون افرادی که قبلاً با BCG واکسینه شده بودند، جدا شد، هیچ کدام سابقه مواجهه با سل را نداشتند. روش ابتکاری برای دسترسی به عناصر غیرمعمول شکل L مشتق شده از خون انسان توسعه یافته است. این روش، مسیر تبدیل عنصر L-فرم غیرقابل کشت به باکتری‌های قابل کشت و سازگاری آنها برای رشد در شرایط آزمایشگاهی را مشخص می‌کند. در این مطالعه برای بررسی ساختار L-form از میکروسکوپ الکترونی استفاده گردید. نتایج: همه جدایه‌ها ویژگی‌های رشد فرم L را نشان دادند (کلنی‌های "تخم مرغی شکل" و بیوفیلم). میکروسکوپ الکترونی مورفولوژی را نشان داد که ویژگی‌های عجیب جمعیت باکتری L-form (عناصر پلی‌مورفیک دارای کمبود دیواره سلولی با شکل و اندازه متغیر) را نشان می‌دهد. شناسایی منظم باکتری‌های اسید فست در اسمیر کشت‌های L-form خون جدا شده، ما را بر آن داشت تا شناسایی آنها را با استفاده از گونه‌های خاص مایکوباکتریوم آغاز کنیم. آزمایشات ژنتیکی چهل و پنج مورد از 97 کشت خون آزمایش شده ژنتیکی، سیگنال‌های مثبت خاصی را برای مایکوباکتریوم‌ها ارائه کردند که با حداقل یکی از 3 روش خاص (16S rRNA PCR؛ IS6110 Real Time PCR و spoligotyping) تأیید شد. نتیجه گیری: در نتیجه، شواهد ژنتیکی به‌دست‌آمده نشان می‌دهد که این اشکال L منشا مایکوباکتریایی دارند. از آنجایی که افراد مورد بررسی با BCG واکسینه شده بودند، می‌توانیم فرض کنیم که اشکال L مایکوباکتریایی شناسایی‌شده ممکن است با ماندگاری واکسن زنده BCG تولید شوند.